Aðferð við ákvörðun glúkósaoxíðasa glúkósa

Meginreglan um aðferðina. Aðferðin er byggð á sértækni verkunar glúkósaoxidasasaensímsins. Þetta ensím oxar glúkósa í viðurvist sameindasúrefnis til að mynda glúkónólaktón, sem vatnsrofnar sjálfkrafa til glúkonsýru. Glúkósaoxíðasi oxar glúkósa til að mynda vetnisperoxíð (H₂Ó₂), sem hvarfast við 4-amínóantípýrín og fenól við verkun peroxídasa. Fyrir vikið myndast bleiklituð efnasamband þar sem sjónþéttleiki við 510 nm er í réttu hlutfalli við styrk glúkósa í sýninu.

glúkósa + O₂ + H₂Ó → glúkonsýra + H₂Ó₂

2 N₂Ó₂ + 4-amínóantípýrín + fenól → kónonymín + 4H₂Ó

Búnaður CPK, skilvindu, hitastillir, rekki, prófunarrör, pipettur, líffræðilegt efni, hvarfefni sem er að finna í vinnulausninni.

tilraunasýni, ml

staðalsýni, ml

aðgerðalaus próf (N₂O), ml

Kvörðunarlausn glúkósa (tilvísun)

Rör eru rækjuð í hitastilli við 37 ° C í 15 mínútur, síðan litað á CPC með grænum síu í kúvettum með lagþykkt 5 mm gegn auðu sýni (N₂O). Bleiki liturinn er stöðugur í 1 klukkustund eftir ræktun.

Útreikningur glúkósainnihald er framleitt með formúlunni:

C =x C staðall þar

C er glúkósainnihald í tilraunasýninu, mól / l,

Eop - ljósþéttni sýnisins,

Borðar - ljósþéttni kvörðunarsýnisins,

C staðall - innihaldið í kvörðunarlausninni, mol / l.

Venjuleg gildi:  nýburar - 2,8-4,4 mmól / l

 börn - 3,9 -5,8 mmól / l

 fullorðnir - 3,9 - 6,2 mmól / l

Blóðsykursfall (GHC).Aukning á blóðsykri stafar af mörgum ástæðum, en samkvæmt þeim er greint frá tveimur hópum blóðsykurshækkunar.

1. Einangrað - tengt ófullnægjandi insúlíni í líkamanum eða vegna óhagkvæmni verkunar hans.

2. Óeðlilegt (utanáliggjandi) - ekki háð áhrifum insúlíns.

Eftirfarandi aðferðir eru mikilvægastar við myndun HHC: aukin niðurbrot glúkógens, aukin nýmyndun, hömlun á myndun glýkógens, minnkuð nýting glúkósa í vefjum undir áhrifum hormónainsúlínhemla: sómatótrópín, glúkósterósar, tyroxín, týrótrópín.

Mæld blóðsykurshækkun kemur fram við of mikla inntöku glúkósa í blóði (til dæmis blóðsykurshækkun með sykurálag). „Lifrar“ blóðsykurshækkun kemur fram í dreifðum lifrarskemmdum.

Viðvarandi og alvarleg blóðsykurshækkun fylgir oftast sykursýki. Venjan er að einangra insúlínháð sykursýki og sykursýki sem ekki er háð sykursýki, eða, hvort um sig, sykursýki af tegund I og sykursýki af tegund II. Myndun sykursýki af tegund I tengist fyrst og fremst skert myndun og umbrot insúlíns.

Annar hópur blóðsykurshækkunar tengist fyrst og fremst ofvirkni innkirtla sem framleiðir hormón - insúlínhemla. Það sést í sjúkdómum eins og Itsenko-Cushings heilkenni og sjúkdómum, lungnasmiti, eitilfrumukvilla, gigtæxlisæxli, glúkógómæxli. Blóðsykursgildi hækka við tiltekna lifrarsjúkdóma (einkum hjá 10-30% sjúklinga með skorpulifur), blóðkornamyndun (litarefni í skorpulifur, brons sykursýki).

Blóðsykursfall (GPG) - lækkun á glúkósa í blóði - oftast tengd algerri eða hlutfallslegri hækkun insúlíns í blóði. Mjög merki um blóðsykurslækkun í utan meltingarvegar er vegna ójafnvægis milli alvarleika aðferða glýkógenólýsu og glýkónósu í lifur við bráða og langvinna lifrarbólgu, skorpulifur, bráð og undirmáls lifrartruflun, áfengis eitrun, eitrun með arseni, fosfór, með langvarandi hindrandi gula, lungnasjúkdóm, lifur . Oft kemur fram lækkun á styrk glúkósa í blóði hjá sjúklingum sem þjást af krabbameini í vélinda og öðrum illkynja æxlum sem eru staðsettir utan brisi (vefjagigt, fibrosarcoma, taugakrabbamein), svo og með óeðlilegt uppköst, lystarstol, sykursýki í lifur, þvagblóðleysi, rífleg brjóstagjöf og glúkósúría hjá þunguðum konum.

Blóðsykurslækkun getur verið af aðal uppruna vegna andlegrar áverka, heilabólgu, blæðingar í subarachnoid, heilaæxli.

1. Erfðir truflun á meltingu kolvetna.

2. Hvaða tegund af blóðsykurshækkun þekkir þú?

3. Hverjar eru orsakir sjúklegs blóðsykurshækkunar?

4. Hver er orsök insúlínháðs sykursýki?

5. Hverjar eru lífefnafræðilegar orsakir arfgengra sjúkdóma: a) glýkógenósu? b) kyrningahrap? c) frúktósíumlækkun? d) galaktósíumlækkun?

6. Hverjar eru lífefnafræðilegar breytingar á umbroti kolvetna við föstu?

7. Meginreglan um aðferðina til að ákvarða glúkósaþol.

Hvenær er ávísað aðferð glúkósaoxíðasa?

Þetta próf er notað til að greina skert sykurþol og þróun á fyrirfram sykursýki, sem og á hæð sjúkdómsins. En í slíkum tilgangi er sjaldan notað greining, þetta er vegna mikils kostnaðar og langrar væntingar um niðurstöðu. Oftast er ákvörðun glúkósa í blóði og þvagi með þessari aðferð notuð við mismunagreiningu sjúkdóma eins og:

Sykur minnkar samstundis! Sykursýki með tímanum getur leitt til alls kyns sjúkdóma, svo sem sjónvandamál, húð- og hársjúkdómar, sár, krabbamein og jafnvel krabbameinsæxli! Fólk kenndi beiskri reynslu af því að staðla sykurmagn þeirra. lesa áfram.

• laktósaóþol heilkenni,
• frúktósaóþol,
• seyting á frúktósa með líkamsvessum,
• aukinn styrkur pentósa í þvagi.

Óumdeilanlegur kostur glúkósaoxíðasa prófsins er nákvæmni þess.

Hver er grunnurinn að þessari aðferð?

Það eru til ýmsar aðferðir til að ákvarða styrk glúkósa í blóði, en glúkósaoxíðasi er nákvæmastur. Það byggist á því að við samspil sykurs og súrefnis í andrúmsloftinu oxast hvarfefnið. Vetnisperoxíð losnar út í lausnina. Þetta efni hefur samskipti við orthotoluidine og myndar lituð efnasamband. Til að hegða þessum viðbrögðum er tilvist sérstaka ensíma nauðsynleg. Við oxunarviðbrögðin verður glúkósaoxíðasi að vera til staðar og þegar litarefni vökvans verður að vera peroxídasi. Litastyrk lausnarinnar fer eftir glúkósainnihaldinu og verður ákafastur við mikið innihald hennar.

Kjarni ákvörðunar glúkósaoxíðasa glúkósa

Mat á niðurstöðunni fer fram með megindlegri aðferð ljósmælinga eftir sama tíma. Það er skylda að nota kvörðunarlausn sem inniheldur ákveðna yfirlýstan sykurstaðal og frá því er hægt að meta styrk glúkósa í vökvum líkamans, oft í blóði.

Hvernig er greiningin framkvæmd?

Efni er tekið frá sjúklingnum á fastandi maga. Fyrir prófið er bláæðablóð notað í magni 5 ml. Í aðdraganda greiningar er sjúklingnum sýnt strangt mataræði. Þetta gerir það mögulegt að meta áreiðanleika niðurstöðunnar og útiloka mögulegar greiningarskekkjur. 2 dögum áður en hann tekur blóðið ætti sjúklingurinn að láta af vondum áföngum við að drekka áfengi og reykja. Það er einnig nauðsynlegt að takmarka neyslu á of sætum mat og forðast streituvaldandi aðstæður þegar mögulegt er.

Til að fá plasma með sykri er blóð skiljuð.

Oftast er þessi aðferð til að ákvarða styrk glúkósa framkvæmd með skilvindu, sem mynda frumefni eru einangruð. Sykurmagnið er þegar ákvarðað í plasma. Þegar öllum nauðsynlegum hvarfefnum er bætt við það sést liturinn eftir 20 mínútur ef prófið er framkvæmt við stofuhita. Útreikningur á glúkósa fer fram samkvæmt kvörðunaráætluninni eða með reglum um skammta.

Rannsóknarhvarfefni

Til að ákvarða sykur er hentugast að nota hraðaðferðir til að ákvarða glúkósa í blóði. Þetta er vegna auðveldrar notkunar og skjótur árangur. Að auki þarf sjúklingurinn ekki að fara á rannsóknarstofu eða sjúkrahús. En ólíkt glúkósaoxíðasa prófinu er slík greining óáreiðanleg. Þar sem það aðgreinir ekki glúkósa frá öðrum sykrum og ákvarðar styrk þeirra saman.

Grunnurinn að glúkósaoxíðasa viðbrögðum er natríumklóríð 9% lausn og sinksúlfat 50%. Þeim er bætt við á stigi skilvindunar blóðs. Að auki er stuðpúðalausn með ediksýru og natríumasetati notuð. Títrunaraðferðin ákvarðar pH við 4,8. Eftir það er glúkósaoxíðasi bætt við, vegna þess sem vetnisperoxíði og peroxídasi losnar, sem tekur þátt í litun lausnarinnar í æskilegan styrk til að fá nákvæma niðurstöðu.

Venjur í greiningunni

Mæling á sykri fer fram í sérstökum einingum - millimól á lítra af lausn.

Glúkósaoxíðasa blóðrannsókn er skylda á fastandi maga og notaðu plasma eða sermi til þess. Venjulegt magn þess fyrir fullorðna bæði fyrir konur og karla er 3,3-5,5. Hjá börnum yngri en 15 ára er þessi tala aðeins lægri og er á bilinu 3,2-5,3. Hjá nýburum er blóðsykur 1,7-4,2. Aukning vísbendinga sést með þróun sjúklinga með sykursýki eða með skert glúkósaþol. Þetta ástand er sykursýki og ef það er ómeðhöndlað á réttum tíma mun það brátt leiða til þróunar á þessari alvarlegu meinafræði.

Virðist enn ómögulegt að lækna sykursýki?

Miðað við þá staðreynd að þú ert að lesa þessar línur núna er sigur í baráttunni gegn háum blóðsykri ekki hjá þér ennþá.

Og hefur þú nú þegar hugsað um sjúkrahúsmeðferð? Það er skiljanlegt, vegna þess að sykursýki er mjög hættulegur sjúkdómur, sem, ef hann er ekki meðhöndlaður, getur leitt til dauða. Stöðugur þorsti, hröð þvaglát, óskýr sjón. Öll þessi einkenni eru þér kunnugleg af fyrstu hendi.

En er mögulegt að meðhöndla orsökina frekar en áhrifin? Við mælum með að lesa grein um núverandi sykursýkismeðferðir. Lestu greinina >>